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◆背景
嗜酸耐热菌Alicyclobacillus acidoterrestris是革兰氏阳性，产芽胞厌氧菌，在自然界中普遍存在。1984年透明苹果汁混浊事件后该物种被大量研究。生长在相对高的温度和酸性条件下的Alicyclobacillus类细菌，称为热-嗜酸性杆菌（TAB） [1, 2, 3].
TAB不能通过巴氏消毒法被灭菌，可能残留在合成的食物和饮料中。尚不清楚TAB是否对人体有害，但产生有异味的愈创木酚，会降解果汁和其他产品的质量。即使没有异味，在分配过程中轻微恶化引起的降解也会降低产品的质量。
避免TAB污染是非常困难的，特别是在土壤中。幸运的是，引起污染的
A. acidocaldarius 和其他主要物种被认为是无害的，TAB引起的损害能够通
过监测被认为有害的A. acidoterrestri来缩小。因为这些物种生长相对高温
和酸性的条件下，不能通过常规的提取培养的方式进行检测。
由于欧洲和其他区域经常发生果汁质变事件，2003年3月日本果汁联合会研发和出版了同一检测TAB方法 [4]。为了容易进行该项检测，我们研发了该试剂盒。该试剂盒不同于会产生异味的愈创木酚的A. acidoterrestri试剂盒。Guaiacol Detection Kit Reference
◆试剂盒组成
YSG 琼脂板20 块板(货号KYO-06810)
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TAB纯化的YSG琼脂培养基 |
10 x 2 板/1 盒 |
a-YSG 培养基 (2mL) 100 个管子(货号KYO-08901)
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加入到YSG培养基的Vanillic acid ，用于愈创木酚的形成 |
2 mL x 100 管 |
愈创木酚检测试剂盒 100 次 (货号KYO-08921)
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试剂 1: 50mM 苯二甲酸氢钾缓冲液 |
60 mL x 2 瓶 |
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试剂 2: 1.3 % 过氧化氢溶液 |
2.5 mL x 1 管 |
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试剂 3:过氧化物酶-磷酸缓冲液 |
2.5 mL x 1 管 |
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阳性对照: Guaiacol (1050 ppm) |
2.5 mL x 1 管 |
◆TAB测试流程图-日本果汁协会
◆实验流程
1. 用接种环，10ul，在YSG琼脂板上提取的新克隆，该克隆还没有形成孢子。在 “Va-YSG medium (2mL), ” (≥1 x 10 8cfu/mL)管内重悬该克隆。.
2. 孵育 45±1°C ，3小时。
3. 加入 1 mL “Guaiacol Detection Kit”的试剂1。
4. 加入 20 μL “Guaiacol Detection Kit”的试剂 2 。
5. 加入 20 μL 试剂 3 of “Guaiacol Detection Kit”试剂3.
6. 混匀。
7. 放置5-10 分钟。
8.检测培养基颜色的变化。在10分钟内读数。
Brown color indicates contamination of AAT
空白 (阴性对照)
使用没有接种的"Va-YSG medium (2mL)" ，进行步骤(2)-(8).
阳性对照
2 mL 灭菌水和100 µL阳性对照混合，进行步骤 (3)-(8).
处理信息
• 请使用高压灭菌方式处理已经使用的培养基（121摄氏度，超过30分钟)
• 保存条件: 2-10 摄氏度，避光。
• 保质期：制造后12个月
产品编号
| 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 产品价格 | |
| KYO-06810 | YSG Agar Plate | 20 PLATE | - | - |
| KYO-08901 | Va-YSG Medium | 100 PC | ||
| KYO-08921 | Guaiacol Detection Kit , | 100 TEST |